胶体金法定性检测试剂企业内部参考品浓度梯度设置与比色卡应用解析

作为一名IVD产品注册专员，经常有企业朋友咨询胶体金法试剂研发和注册申报中的细节问题。其中一个常见疑问就是关于企业内部参考品浓度梯度的可视化表达方式，特别是能否使用比色卡，以及在申报资料中如何体现。这个问题看似简单，但涉及到产品研发的严谨性和注册资料的合规性，咱们今天就来好好聊聊。

企业内部控制参考品浓度梯度可以用比色卡表示吗？

答案是可以的。胶体金法定性检测试剂，主要是通过观察检测线（T线）和质控线（C线）的显色情况（有无、深浅）来判断样本中目标物（如病原体抗原/抗体、特定蛋白标志物）的存在与否。企业在研发过程中，为了评估试剂性能的稳定性、批间一致性以及确定临界值（Cut-off值），通常会配制包含不同浓度目标物的内部参考品，形成一个浓度梯度系列。

1.这个浓度梯度系列的目标，是模拟实际样本中目标物从“检测不到”到“低浓度”（临界值附近）再到“中/高浓度”的变化过程。传统的做法可能是在研发记录中详细记录每个参考品对应的具体浓度数值。然而，在实验室实际操作和日常质控中，研发人员和技术人员也需要一个直观、快速的判读依据。

2.这时候， 比色卡（或称为色阶卡）就派上用场了。企业可以将配制好的不同浓度的内部参考品滴加到试剂条上，待反应完成后，将显色结果（主要是T线的颜色深浅）排列、拍照或扫描，制作成一张标准的比色卡图片。这张比色卡上的每一个色阶，就对应着参考品浓度梯度中的一个特定浓度点，或者代表一个特定的显色强度范围。网上很多讨论试剂研发流程的分享，也提到过类似做法，作为辅助研发人员直观判断显色均一性和梯度效果的工具。

3.使用比色卡的好处是直观、便捷，便于研发人员在优化工艺、调试配方时快速比对不同批次或不同条件下的显色差异，也方便生产或质检人员在日常质控中快速判断试剂条的显色是否符合预期梯度。国家药监局医疗器械技术审评中心（器审中心）在相关答疑中也指出，这种基于色阶的判读方式，有助于反映样本在特定浓度下的显色均一性。

所以，总结这第一点：企业完全可以根据自身研发和质控流程的实际需要，自行决定是否为内部参考品浓度梯度制作并使用比色卡。法规没有强制要求必须使用，但也没有禁止，这属于企业内部控制策略的一部分。

如果用了比色卡，申报资料里需要写进去吗？怎么写？

如果企业在研发和质控过程中确实设置并使用了比色卡来辅助表示内部参考品浓度梯度，那么在提交注册申报资料时，必须在相关部分进行体现。关键点在于“研究资料”中的“参考品”部分。

1.参考品制备过程的详细描述：在申报资料的“研究资料”章节中，详细说明企业内部参考品的来源（如重组蛋白、临床样本阳性池等）、配制方法（如稀释基质、稀释倍数）、定值过程（如何确定每个梯度点的浓度值）以及最终确定的浓度梯度范围。这部分描述是基础，无论是否使用比色卡都需要提供。

2.明确说明比色卡的设置和应用：如果企业使用了比色卡，那么在上述参考品制备描述的基础上，必须额外清晰地写明：

（1）比色卡是如何制作的：是基于哪一批次或哪个特定条件下配制的参考品制作的？使用了什么方法（如拍照、扫描）？是否进行了标准化处理（如白平衡校正）？

（2）比色卡与浓度梯度的对应关系：比色卡上的每一个色阶具体对应参考品浓度梯度中的哪个浓度点或哪个浓度范围？这种对应关系是如何建立和验证的？例如，可以说明“色阶1对应浓度为X ng/mL的参考品显色结果，色阶2对应浓度为Y ng/mL...”。

（3）比色卡在研发和性能评估中的作用：简要说明比色卡在哪些环节被使用，比如在检出限确定时用于判断临界显色水平，在精密度研究中用于评估不同批次/不同操作者判读显色一致性的工具等。器审中心明确建议，在分析性能评估（如检出限、精密度、特异性）中提交利用内部色卡（比色卡）进行研究的结果，因为它能提供关于显色均一性的重要信息。

简单说，在申报资料的“参考品制备”相关内容里，不能只说“我们做了个比色卡”，而是要把参考品是怎么配出来的，以及这个比色卡具体是怎么做出来的、怎么用的、代表什么意义，都原原本本、清清楚楚地写明白。这样审评老师才能理解企业质量控制的手段和依据，评估其科学性和可靠性。

总结一下

关于胶体金法定性检测试剂企业内部参考品浓度梯度是否能用比色卡表示以及在注册资料中如何体现，核心要点就两条：

1.企业可自行确定是否设置比色卡。用不用，企业自己根据内部管理需求定。

2.如果企业设置了比色卡，研究资料中需写明企业参考品配制过程及比色卡是如何设置的。只要用了，在申报资料的研究部分，就必须把参考品怎么配的、比色卡怎么做怎么用的，详细描述清楚。

理解并落实好这两点，企业在进行胶体金试剂研发和注册申报时，在参考品浓度梯度管理和相关申报资料准备上，就能做到既符合法规要求，又能有效支持产品的性能宣称。希望这篇文章能帮您理清思路。