蛋白检测类的免疫层析法定性检测试剂，技术要求附录的企业参考品制备中企业参考品是否需要附具体浓度值？

来聊聊蛋白检测类免疫层析法定性试剂注册中的一个具体问题：在准备技术要求附录里的企业参考品时，到底需不需要把参考品的具体浓度值给附上？这个问题看似细节，但在注册申报和产品质量控制中非常关键。不同于病原体检测试剂，蛋白类定性检测对浓度的精密度要求更高，因为它直接关系到临床判读的“阳性”和“阴性”结果是否准确可靠。网上对这个问题的讨论也不少，核心都聚焦在法规要求和实际操作的可行性上。接下来，我就结合相关法规和审评要求，把这个事情给大家梳理清楚。

企业参考品的作用与构成

企业参考品是啥？简单说，就是企业自己制备的，用于在研发、生产和质量控制过程中验证试剂性能的一套标准品。对于蛋白检测类的免疫层析法定性试剂，这套参考品通常得包含几个关键部分：阴性参考品、阳性参考品和特异性参考品。阴性参考品用来验证试剂会不会把不该阳性的样本错判成阳性（也就是假阳性），它通常设置在临界值附近一个比较低的浓度水平，专业上常叫C5浓度水平，意思是这个浓度下，理论上只有5%的检测结果可能呈阳性。阳性参考品则是验证试剂能不能把该阳性的样本正确检出（避免假阴性），它设置在临界值附近一个比较高的浓度水平，叫C95浓度水平，意思是这个浓度下，理论上95%的检测结果应该是阳性。特异性参考品呢，主要是看试剂会不会被其他可能存在于样本里的物质干扰，导致结果不准。这三类参考品共同构成了评估试剂分析性能的基础。

法规对浓度值的要求

那么核心问题来了，在准备这些参考品的技术要求附录里，要不要写明具体的浓度值呢？答案是：需要体现具体的浓度值。这个要求是有明确依据的。根据北京市药品监督管理局发布的《免疫层析法检测试剂（盒）产品技术审评规范（2017版）》，以及北京市药监局在《北京市医疗器械审评检查新300问》(中册)里的官方解答，都明确指出：该类型检测试剂（指蛋白检测类的免疫层析法定性检测试剂）不同于某些病原体检测试剂，其企业参考品（包括阴性参考品、阳性参考品、特异性参考品等）在制备时，需要体现具体的浓度值。 为什么呢？因为蛋白检测的定量属性更强，其临界值（Cut-off）的设置和验证对浓度的依赖性极高。C5和C95浓度点本身就是围绕临界值定义的（临界值减少一定浓度≈C5，增加一定浓度≈C95），它们定义了试剂的“检测灰区”。只有明确了这些浓度值，才能科学地验证试剂在临界值附近的性能是否符合要求（例如，阴性参考品在C5浓度点的阴性符合率是否≥95%，阳性参考品在C95浓度点的阳性符合率是否≥95%）。 网上很多技术讨论也强调了这一点，认为浓度值的明确是保证性能验证可追溯、可重复的关键。

制备要求与信息呈现

明确了需要附浓度值，那具体怎么操作呢？首先，企业在配制这些参考品时，就要科学地确定目标浓度。阴性参考品的目标浓度应设在临界值附近的C5水平，阳性参考品设在临界值附近的C95水平。其次，在撰写技术要求附录的企业参考品部分时，应明确列出每种参考品（阴性、阳性、特异性）的具体目标浓度值（或浓度范围，但需说明其与临界值/C5/C95的关系）。 这里要注意，虽然要求体现浓度值，但根据《免疫层析法检测试剂（盒）产品技术审评规范（2017版）》，技术要求本身对临界值的具体浓度水平体现不作强制要求（这是为了适应当时企业研发水平的现状），但这并不意味着企业参考品的浓度值可以模糊不清。 企业在研究资料中必须详细说明参考品的配制过程、原料来源（如使用的标准物质、基质类型）、赋值方法（如何确定其浓度值）以及稳定性研究数据。如果参考品是企业自配的，这点尤其重要。 简单说，附录里需要写清楚浓度值，背后的支撑数据（配制方法、赋值依据）则放在研究资料中。

总结

该类型检测试剂不同于病原体检测试剂，企业参考品一般包括阴性参考品（临界值附近C5浓度水平）、阳性参考品（临界值附近C95浓度水平）、特异性参考品等，需要体现具体的浓度值。企业在研制及注册过程中可参考北京市药品监督管理局发布的《免疫层析法检测试剂（盒）产品技术审评规范（2017版）》。总而言之，对于蛋白检测类的免疫层析法定性试剂，在技术要求附录的企业参考品制备部分，明确列出阴性参考品（C5浓度水平）、阳性参考品（C95浓度水平）和特异性参考品的具体浓度值是法规和审评的明确要求。这直接关系到试剂在临界值附近性能的科学验证和有效评价。企业在操作时，务必依据《免疫层析法检测试剂（盒）产品技术审评规范（2017版）》等指导文件，同时确保研究资料能充分支持参考品的配制和赋值过程。