以免疫层析法为检验原理的定性体外诊断试剂进行精密度研究时有哪些考量因素？

免疫层析法作为定性体外诊断试剂的主流技术之一（如胶体金法），通过抗原-抗体特异性结合实现快速检测。精密度研究是评价试剂结果一致性的核心环节，直接关系到临床使用的可靠性。根据国家药监局审评中心的指导，这类试剂的精密度研究需系统性设计实验，覆盖可能影响结果的关键变量，并采用科学的数据分析方法。下面具体展开研究中的关键步骤。

样本浓度的选择与设计

精密度研究必须包含不同浓度的样本，尤其是接近临界值的浓度水平。例如：

- 阴性样本（不含目标物）

- 弱阳性样本（略高于检出限）

- 中/强阳性样本（典型病理浓度）

这种设计能验证试剂在不同浓度下的稳定性。实际操作中，建议使用临床真实样本或经标定的质控品，避免人工模拟样本带来的偏差。若样本稳定性不足，需分装冻存并验证冻融影响。

试剂批次与检测轮次的安排

至少纳入3个不同生产批次的试剂，每批次进行多轮重复检测（通常≥20次）。重点观察：

- 同一批次内结果的重复性

- 不同批次间结果的一致性

批次差异可能来自原料、包被工艺或生产环境变化，多轮次测试可暴露潜在波动。

时间与操作者因素的纳入

实验需跨越不同日期（建议≥5天），由多名操作者（≥2人）参与检测。例如：

- 操作者A在周一、周三检测

- 操作者B在周二、周四检测

此举可评估人员操作差异、环境温湿度变化、设备校准状态等日常变量对结果的影响。

地点差异的验证要求

若试剂拟在多机构使用，需在≥2个实验室进行比对研究。各实验室应：

- 采用统一实验方案

- 使用相同型号设备

- 独立报告数据

通过分析实验室间差异（如显色强度偏差），确认试剂的跨场地适用性。

数据记录与分析方法

除常规阴阳性结果外，必须记录与标准色卡的比对标值（如L1、L2、L3等级）：

1. 显色强度量化：将检测线颜色与色卡对照，记录具体等级而非主观描述；

2. 一致性分析：计算不同条件下L值的变异系数（CV%），超过15%需排查原因；

3. 临界样本重点分析：对弱阳性样本，统计假阴性/假阳性率，确保临床决策安全。

总结

对于以胶体金法等免疫层析法为检验原理的定性体外诊断试剂，在进行精密度研究时，应考虑不同样本浓度、试剂批次、检测轮次、时间、操作者、地点等影响因素进行实验设计。在检测结果中，不仅需要提交阴阳性结果，还应提交与标准色卡比对的数据（例如L1、L2、L3……），并对显色强度进行一致性分析。